A.低溫保存管之臨時存放及解凍中之一般標準菌種臨時存放及活化

　　步驟一：低溫保存管應(yīng)存放于－20~－80之低溫條件下.

　　步驟二：準備37之70﹪(V/V)酒精浴槽(只能在電氣水浴槽中改放酒精,不可以火加溫,以免危險;若以37水浴取代,應(yīng)避免水中微生物污染),其中事先安放小試管架(可放置低溫保存管之大小),液面不可高達管塞.

　　步驟三：將低溫保存管從低溫保存條件中取出,置于37浴槽之小試管架上.

　　步驟四：不斷輕微搖動低溫保存管,液面不可高至管塞,直至結(jié)冰*溶解(約需2分鐘).

　　日水平板培養(yǎng)基圖片

　　B.菌株活化:在無菌操作下

　　步驟一：用無菌微量吸管,從已溶解之低溫保存管吸取1-2滴之菌液,滴入固態(tài)培養(yǎng)基(培養(yǎng)基編號及溫度示于菌株訂購單)某一邊緣附近,以劃線法接種于培養(yǎng)基.

　　步驟二：將接種好的培養(yǎng)基置于溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng).

　　C.劃線法

　　步驟一：手持金屬接種環(huán),用酒精燈將接種環(huán)(共約5公分)燒至火紅,并不斷來回?zé)窘饘俟潭U之前約10公分,等待約10秒鐘,將接種環(huán)前端輕觸培養(yǎng)基邊緣凝膠(無菌體部份),待接種環(huán)*冷卻后,以環(huán)沾黏菌滴,由培養(yǎng)基邊緣向中央輕輕橫劃緊接的并行線,直到涵蓋1/3培養(yǎng)基為止(I區(qū)).

　　步驟二：灼燒接種環(huán),待數(shù)秒冷卻后,旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基自I區(qū)涂布的邊緣再橫劃數(shù)條線到未接種的區(qū)域(II區(qū)).

　　步驟三：重復(fù)2的動作完成III區(qū)與IV區(qū).

　　步驟四：灼燒接種環(huán),將接種環(huán)歸位.

　　標準菌種使用注意事項

　　1、菌種活化前，將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中，長時間室溫下放置會導(dǎo)致菌種衰退；

　　2、冷凍管開封、凍干粉復(fù)溶、菌株恢復(fù)培養(yǎng)等操作應(yīng)在無菌條件下進行；

　　3、一些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長；

　　4、苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，敬請正確選擇，不清楚時來電詢問；

　　5、某些厭氧菌的培養(yǎng)，自開封到接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)；培養(yǎng)過程中亦要保

　　持厭氧狀態(tài)；

　　6、某些菌種，如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促進生長；

　　7、如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動、復(fù)溶液渾濁等異常情況，應(yīng)停止使用對應(yīng)產(chǎn)品。

　　8、部分菌種有致病性、擴散性，請專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護性操作。